摘要：在大花蕙兰组培快繁过程中，植物激素对原球茎的诱导、增殖及幼苗的分化有显著影响。细胞分裂素6-BA和生长素N从最佳配比对大花蕙兰组织培养很重要，尤其是细胞分裂素影响较大。
关键词：大花蕙兰；组织培养；植物激素
大花蕙兰(Cymbidium)是兰科兰属中一部分大花附生种及其杂交种的统称，属复茎地生兰或半附生兰，原产地在喜马拉雅山脉及东南亚高山上，是世界五大重要商品兰花之一，近几年在我国花卉市场上流行的高档室内盆栽花卉，具有极高的观赏价值，株型高大雄伟，花大而多，色彩鲜艳。由于大花蕙兰多为杂交种，种子繁殖无法保持其品质特性，其结实率也相当低，分株能力弱，因而繁殖系数低，繁殖速度慢，远远不能满足商品化生产的需求，而采用组织培养方法进行原球茎增殖可以达到工厂化生产目的。试验研究植物激素对大花蕙兰组织培养快速繁殖的影响，并成功地建立了快繁体系，可以用于工厂化育苗。
1材料与方法
1．1材料
大花蕙兰采自河南农业大学兰花园中FN4品种，切取健康饱满10～15 cm长的芽，剥去外部叶片直到5 mm大小，消毒处理后作为外植体诱导材料。
1．2 植物激素对原球茎诱导的影响
以MS为基本培养基，6-BA设0．5、1.0、1．5、2．0 mg／L(单位下同)4个浓度水平，NAA浓度为0．2 mg／L，培养基均附加香蕉汁100 g／L，活性炭0．5 g／L，每处理接10瓶，每瓶接1个茎尖，培养30 d后，调查原球茎诱导率。
1．3植物激素对原球茎增殖及幼苗分化的影响
将诱导的原球茎分别接种于下列不同培养基中：① MS+6-BA 1．0+NAA 0．1；②MS+6-BA 1．0+NAA0．5；③MS+6-BA 1．5+NAA 0．1；④MS+6-BA l．5+NAA 0．5；⑤MS+6-BA 2．0+NAA 0．1；⑥MS+6-BA2．0+NAA 0．5，以上培养基均加入香蕉汁130 g／L，活性炭1.0 g／L。每瓶接种10个原球茎，每处理10瓶，培养40 d后，调查增殖系数及成苗数。
1．4植物激素对幼苗生根的影响
将原球茎增殖及幼苗分化培养中高于2 cm的幼苗切出，转接到下列生根壮苗培养中：①1／2 MS+6-BA0．1+NAA 0．5；②1／2 MS+6-BA 0．3+NAA 0．5；③1／2 MS+6-BA 0．5+NAA 0．5；④1／2 MS+6-BA 1．0+NAA0．5，每种培养基均附加香蕉汁150 g／L，活性炭1．5 g／L。每瓶接20个幼苗，每处理10瓶，30 d后统计生根率及生长情况。以上MS培养基中白糖浓度为30g／L，1／2 MS培养中的白糖浓度为20 g／L，琼脂为7g／L，pH值为5．3。培养条件：温度为24～26℃，光照强度为1 000～1 800 lx，光照时间12～14 h／d。
2结果与分析
2．1植物激素配比对原球茎诱导的影响
从表l可以看出，随着6-BA浓度的增大，原球茎诱导率逐步增高，在6-BA 1．5时达到最大，6-BA浓度再增大，原球茎诱导率下降，生长中发现细胞分裂素低浓度形成原球茎慢，并且诱导出原球茎数目少，高浓度形成愈伤多，原球茎少。在培养基MS+6-BA 1．5 mg／L+ NAA0．2 mg／L+香蕉汁100 g／L+活性炭0．5g／L原球茎诱导率达到90％，并且每个茎尖分化出4～5个原球茎。
表1 植物激素配比对原球茎诱导的影响
|
6-BA/mg·L-1 |
NAA/mg·L-1 |
诱导率/％ |
原球茎分化情况 |
|
0.5 |
0.2 |
10 |
茎尖很少分化 |
|
1.0 |
0.2 |
40 |
茎尖形成２～３原球茎 |
|
1.5 |
0.2 |
80 |
每个分化４～５个原球茎 |
|
2.0 |
0.2 |
20 |
第个分化１～２原球茎 |
2．2植物激素对原球茎增殖及幼苗分化的影响
大花蕙兰原球茎在增殖的过程中有幼苗的分化，长时间不转接，会形成很多苗，因此增殖与幼苗分化同时进行。合理的激素配比会达到理想增殖与成苗。从表2可以看出，随着细胞分裂素的增大，原球茎增殖系数也增大，但幼苗分化数却随着降低，综合考虑增殖与成苗，培养基④最好，因此最佳增殖及幼苗分化培养基是 MS+6-BA 1．5 mg／L+NAA 0．5 mg／L+香蕉汁130 g／L+活性炭1．0 g／L。
表2 不同激素配比对原球茎增殖及幼苗分化的影响
|
培养基编号 |
接种总数/个 |
原球茎总数/个 |
增殖系数 |
分化苗数/个 |
|
① |
100 |
420 |
4．2 |
110 |
|
② |
100 |
610 |
6．1 |
130 |
|
③ |
100 |
1080 |
10．8 |
210 |
|
④ |
100 |
1150 |
11．5 |
480 |
|
⑤ |
100 |
1100 |
11．0 |
120 |
|
⑥ |
100 |
1230 |
12．3 |
160 |
2．3植物激素对幼苗生根的影响
幼苗接在4种不同的生根培养基上均能生根，随着细胞分裂素浓度的增大，生根率逐渐降低，说明细胞分裂素对生根有一定的促进作用，但浓度加大引起增殖影响生根，培养基①生根率高，生根条数多，苗长得好。故生根壮苗最佳培养基是1／2 MS+6-BA 0．1 mg／L+ NAA0．5 mg／L+香蕉汁150 g／L+活性炭1.5 g／L。
表3 植物激素对幼苗生根的影响
|
培养基编号 |
接种株数/株 |
生根株数/株 |
生根率/％ |
平均根长/cm |
苗长势 |
|
① |
200 |
198 |
99 |
>4 |
苗高,长势均等,较绿 |
|
② |
200 |
150 |
75 |
2～3 |
中等高度,较绿 |
|
③ |
200 |
120 |
60 |
1～2 |
生长缓慢,浅绿 |
|
④ |
200 |
60 |
30 |
<1.5 |
生长极满慢,浅绿 |
3小结与讨论
植物激素中的细胞分裂素6-BA和生长素NAA对大花蕙兰FN4组织培养快速繁殖影响很大。原球茎最佳诱导培养基是MS+6-BA 1．5 mg／L+NAA0．2 mg／L+香蕉汁100 g／L+白糖30 g／L+活性炭0．5g／L+琼脂7．0 g／L，原球茎诱导系数可达到4～5。 原球茎增殖及幼苗分化培养基是MS+6-BA1．5 mg／L+NAA 0．5 mg／L+香蕉汁130 g／L+活性炭1．0 g／L+白糖30 g／L十琼脂7．0 g／L，探索最佳增殖与幼苗分化培养基中激素配比对大花蕙兰FN4工厂化育苗有很大意义。生根壮苗培养基1／2 MS+6-BA0．1 mg／L+NAA 0．5 mg／L+香蕉汁150 g／L+活性炭1．5g／L+白糖20g／L+琼脂7．0 g／L。 （田志强 河南农业大学科技处）
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