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用叶片培养菊花苗
植物的组织培养通常指所有类型植物的无性培养技术。可用来作为培养物的那部分,是植物的器官、组织或细胞,通称为外植体。用于商品性生产中的外植体,一般取用植物体的某些器官:如茎尖、叶片,花等。组织培养技术可使繁殖系数大大提高,国外在七十年代已开始应用于生产,国内近年来也有用茎节和花蕾作为外植体培养成功的报道。 江苏农学院园艺系和江都曹王林园场协作进行的菊花快速繁殖研究,取用的外植体为叶片,具有取材不受季节限制的优点。在工厂化育苗时,可与茎节、花蕾同时培养,以充分利用稀少的品种资源。而在无法取蕾和取茎节的季节,其叶片仍可作为唯一的材料来源。 试验结果,叶片培养的分化率比花蕾略低,而分化系数与之相当;与茎节相比,则二项指标皆显著高于茎节。叶片培养使用的基本培养基为MS(1982)培养基,添加琼脂8克/升,蔗糖30克/升,PH调至5.6-6.0。分化培养基使用的激素为BA(6-苄基氨基嘌呤),和NAA(萘乙酸)初代培养使用的外植体为未老化的嫩叶。表面消毒用70%的酒精,然后进一步用0.1%升汞灭菌。无菌水漂洗后,用滤纸吸干水份,剪成0.7至1平方厘米小块,即可接种。培养室温度为20~25℃,开始两周为暗处理,其后为半光照,光照强度2000LUX(照度)。 外植体接种后五天,可见中部隆起,边缘增厚;两周时膨大率达55.2%,并有11%出现愈伤组织,二十天时愈伤组织分化率达90%以上,个别处理开始分化出小芽和芽丛。接种二个月后统计,最佳处理外植体幼苗分化率达87.5%,每外植体分化芽数为8.14个,芽高一般达2-3厘米,可直接转生根培养。 生根培养基可采用1/4MS培养基,添加激素NAA或IAA(吲哚乙酸)。培养十天后,生根率为83/100%,平均每苗根数达5-6条。入土成活率初步试验为84.2%,经过生根培养的无根苗(部分根原基已形成)入土成活率也达87%,但细长的瘦弱苗入土成活率较低。从开花情况看,6月20日前人土的都能在11月份正常开花,稍后人土的也在12月陆续开花。在已开花的品种中,基本都保持了原品种的花色、花形等固有特征,而具有商品生产特性。其中"二乔"这一品种,在顶花保持原有性状的同时,侧花发生了绿色变异。从获得的试管苗植株看,发生变异的部位均为顶花向下的第十节位,将其摘除后其上发生的二次侧蕾仍为绿菊。
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