铁线蕨（Adiantum capillus-veneris）

　　材料类别:茎尖。

　　培养条件

    （1）愈伤组织诱导培养基：MS+6-BA2.0mg?L-1(单位下同)；（2）愈伤组织继代增殖培养基：MS+6-BA1.0；（3）愈伤组织分化培养基：1/2MS+6-BA0.5；（4）再生植株壮苗培养基：1/2MS+6-BA0.1；（5）生根培养基：1/2MS+NAA0.5。以上培养基均含蔗糖30 g?L-1、琼脂0.7%，PH5.5~5.8。培养温度（25±2）℃，光照度1500~2000lx，光照12h?d-1。

　　生长与分化情况

　　1 无菌材料的获得

    取铁线蕨盆栽植株土中冒出尚未能展开形成叶的幼嫩茎尖为外植体，用自来水洗净后，在超净工作台上用75%酒精浸泡30 s，再用0.1%升汞浸泡3 min，无菌水冲洗3次。第二次用0.1%升汞浸泡2min，无菌水冲洗5次。将表面消毒的外植体茎尖接种到愈伤组织诱导培养基上。

　　2 愈伤组织诱导与增殖

    茎尖在愈伤组织诱导培养基上，在光照条件下，经60d培养，开始出现绿色细小晶体状愈伤组织。继续培养10d后，将诱导分化出的愈伤组织转到愈伤组织继代增殖培养基中培养，生成的愈伤组织结构致密，生长速度较缓慢。初期每60d继代1次，每继代1次愈伤组织块体积扩大约1倍。随着继代代数的增加，增殖速度逐渐加快，愈伤组织的颜色也由绿色转为墨绿色。继代5代后，愈伤组织体积增殖1倍，平均时间缩短为45d左右。

　　3 愈伤组织分化

    取继代后的愈伤组织块接种到愈伤组织分化培养基上，在同样条件下培养，30d后在愈伤组织块上逐渐长出灰绿色的丝状体，继续培养后形成绿色细长丛生状丝状体。切取丛生状丝状体转到再生植株壮苗培养基上，10d后丝状体慢慢长出茎和小叶，形成丛生小苗。

　　4 生根与移栽

    将分化出茎、叶的丛生小苗转入生根培养基中培养30d可生根出瓶，生根率达100%。在广州地区，铁线蕨的出瓶宜选择天气凉爽的10月份至翌年4月份。此时气温介于10~30℃之间，移栽成活率高。夏季高温对铁线蕨的生长有一定的影响。铁线蕨瓶苗出瓶可不经炼苗，直接从培养瓶中取出生根苗，洗净附着的培养基，用椰糠种植。种植前先将椰糠用水浇透，小苗种好后再浇透定根水，放在覆盖有95%遮阳网的塑料大棚内养护。定植初期，注意喷雾保湿。1周后小苗可定根生长。成活率95%以上。2周后可用0.1%的尿素水肥结合给小苗施肥，每周1次，养护1个半月可上盆种植。

　　意义与进展

    铁线蕨姿态文静、幽雅、株形、叶形优美，是蕨类植物中最具有观赏价值的小型室内盆栽植物，深受人们的喜爱。传统的繁殖方法主要以分株繁殖为主，繁殖速度慢，根茎易老化，造成植株过高，退化，观赏价值下降。用组织培养技术可极大的提高繁殖系数，恢复品种观赏特性，是一条值得考虑的途径。以铁线蕨幼嫩茎尖诱导愈伤组织和植株再生尚未见报道。